大鱼歌曲郭沁:内切酶和外切酶的定义是什么？

jpkc.xmu.edu.cn/.../ 模块三、原核生物分子生物学实验/实验十一%20DNA酶切.ppt -
　　二、限制性核酸内切酶的命名
　　按酶的来源的属、种名而定，取属名的第一个字母与种名的头两个字母组成的三个斜体字母作略语表示；如有株名，再加上一个字母，其后再按发现的先后写上罗马数字。例如：从流感嗜血杆菌d株（Haemophilus influenzae d）中先后分离到3种限制酶，则分别命名为HindⅠ、HindⅡ和HindⅢ。
　　三、限制性核酸内切酶的分类
　　按限制酶的组成、与修饰酶活性关系，切断核酸的情况不同，分为三类：
　　Ⅰ类限制性核酸内切酶 由3种不同亚基构成，兼具有修饰酶活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性，它能识别和结合于特定的DNA序列位点，去随机切断在识别位点以外的DNA序列，通常在识别位点周围400-700bp。这类酶的作用需要Mg2+，S腺苷甲硫氨酸及ATP。
　　Ⅱ类限制性核酸内切酶 与Ⅰ类酶相似，是多亚蛋白质，既有内切酶活性，又有修饰酶活性，切断位点在识别序列周围25-30bp范围内，酶促反应除Mg2+外，也需要ATP供给能量。
　　Ⅲ类限制性核酸内切酶 只由一条肽链构成，仅需Mg2+，切割DNA特异性最强，且就在识别位点范围内切断DNA。是分子生物学中应用最广的限制性内切酶。通常在重组DNA技术提到的限制性核酸内切酶主要指Ⅱ类酶而言。
　　表1 DNA重组技术中最常用的工具酶
　　酶 主要用途
　　限制性核酸内切酶 识别DNA特定序列，切断DNA链
　　DNA聚合酶Ⅰ
　　或其大片段（Klenow） ①缺口平移制作标记DNA探针
　　②合成cDNA的第二链
　　③填补双链DNA3’凹端
　　④DNA序列分析
　　耐热DNA聚合酶（Taq DNA聚合酶等） 聚合酶链反应（PCR）
　　DNA连接酶 连接两个DNA分子或片段
　　多核苷酸激酶 催化多核苷酸5’羟基末端磷酸化，制备末端标记探针
　　末端转移酶 在3’末端加入同质多聚物尾
　　SI核酸酶，绿豆核酸酶 降解单链DNA或RNA，使双链DNA突出端变为平端
　　DNA端酶Ⅰ 降解DNA，在双链DNA上产生随机切口
　　RNA酶A 降解除RNA
　　磷酸酶 切除核酸末端磷酸基
　　http://www.google.com/search?q=%E5%86%85%E5%88%87%E9%85%B6%E7%9A%84%E5%AE%9A%E4%B9%89&btnG=%E6%90%9C%E7%B4%A2&hl=zh-CN&newwindow=1&rls=GGLG%2CGGLG%3A2006-11%2CGGLG%3Azh-CN

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二、限制性核酸内切酶的命名
按酶的来源的属、种名而定，取属名的第一个字母与种名的头两个字母组成的三个斜体字母作略语表示；如有株名，再加上一个字母，其后再按发现的先后写上罗马数字。例如：从流感嗜血杆菌d株（Haemophilus influenzae d）中先后分离到3种限制酶，则分别命名为HindⅠ、HindⅡ和HindⅢ。
三、限制性核酸内切酶的分类
按限制酶的组成、与修饰酶活性关系，切断核酸的情况不同，分为三类：
Ⅰ类限制性核酸内切酶 由3种不同亚基构成，兼具有修饰酶活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性，它能识别和结合于特定的DNA序列位点，去随机切断在识别位点以外的DNA序列，通常在识别位点周围400-700bp。这类酶的作用需要Mg2+，S腺苷甲硫氨酸及ATP。
Ⅱ类限制性核酸内切酶 与Ⅰ类酶相似，是多亚蛋白质，既有内切酶活性，又有修饰酶活性，切断位点在识别序列周围25-30bp范围内，酶促反应除Mg2+外，也需要ATP供给能量。
Ⅲ类限制性核酸内切酶 只由一条肽链构成，仅需Mg2+，切割DNA特异性最强，且就在识别位点范围内切断DNA。是分子生物学中应用最广的限制性内切酶。通常在重组DNA技术提到的限制性核酸内切酶主要指Ⅱ类酶而言。
表1 DNA重组技术中最常用的工具酶
酶 主要用途
限制性核酸内切酶 识别DNA特定序列，切断DNA链
DNA聚合酶Ⅰ
或其大片段（Klenow） ①缺口平移制作标记DNA探针
②合成cDNA的第二链
③填补双链DNA3’凹端
④DNA序列分析
耐热DNA聚合酶（Taq DNA聚合酶等） 聚合酶链反应（PCR）
DNA连接酶 连接两个DNA分子或片段
多核苷酸激酶 催化多核苷酸5’羟基末端磷酸化，制备末端标记探针
末端转移酶 在3’末端加入同质多聚物尾
SI核酸酶，绿豆核酸酶 降解单链DNA或RNA，使双链DNA突出端变为平端
DNA端酶Ⅰ 降解DNA，在双链DNA上产生随机切口
RNA酶A 降解除RNA
磷酸酶 切除核酸末端磷酸基