s7天使打野:转化子为什么在LB液体培养基上培养不出来

来源:百度文库 编辑:高考问答 时间:2024/05/03 06:53:51
用PBI121与我的目的片断酶切连接构建植物表达载体,连接后使用DH5α做的感受态转化,长出转化子,但是挑单克隆到具相应抗性的LB液体培养基上培养却长不出来了,降低抗性也没用,不知道什么原因,请高手指点,不胜感激!

抗性只能抑制不含目的质粒的菌的生长,不能杀死,
在你培养超过一定时间后,抗性消失,不含目的质粒的菌开始生长繁殖,而含有质粒的菌因为复制时需更多材料能量,所以在竞争上处于劣势,不含质粒的菌会大量增殖,含质粒的菌比例减小。
会不会是你培养时间久了?
确认感受态没问题吗?